浮游菌采樣器的采樣和培養(yǎng)

　　微生物采樣器利用安德森采樣器，在一定的流量條件下對(duì)空氣中懸浮的微生物顆粒進(jìn)行采樣，通過(guò)改變孔徑的方法將不同粒徑的顆粒物進(jìn)行六級(jí)分離，達(dá)到對(duì)一定體積的氣體中所有生物活性顆粒物采集的目的。安德森原理中沒(méi)有指明每一級(jí)分別采什么菌，但卻給出了每一級(jí)所能捕獲的顆粒的粒徑范圍。一般情況下，空氣流入采樣器的橫截面積是固定的，流量與流速是成線性正比的關(guān)系。依據(jù)安德森原理，空氣中的顆粒進(jìn)入采樣器，只有流速乘以顆粒的質(zhì)量值足夠大，大于培養(yǎng)基表面氣墊阻力乘以受阻時(shí)間值時(shí)，該微生物顆粒才能吸附在培養(yǎng)基上，否則被風(fēng)機(jī)抽走并排出采樣器。

　　所以撞擊頭的設(shè)計(jì)就成為了關(guān)鍵，這個(gè)孔開(kāi)大開(kāi)小，長(zhǎng)條形還是圓形甚至五角形都是可以的，孔洞式與狹縫式除了現(xiàn)狀上的區(qū)別，理論上沒(méi)有其他區(qū)別，但是他們都必須要通過(guò)第三方的實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證捕獲率，通常捕獲率在90%-110%之間，都算合格的。

　　2、工作過(guò)程

　　（1）在有平臺(tái)的潔凈室內(nèi)編制培養(yǎng)皿(XX潔凈室,XX測(cè)點(diǎn)),操作前應(yīng)用浸濕75%乙醇的醫(yī)用脫脂棉花擦拭平臺(tái)。測(cè)試人員雙手用同樣方法嚴(yán)格消毒。在編制過(guò)程中再次仔細(xì)檢查培養(yǎng)基平皿的質(zhì)量,有變質(zhì)、破損或污染不能使用。

　　（2）用浸濕75%乙醇的醫(yī)用脫脂棉花擦拭采樣器的采樣口,采樣管、采樣器的項(xiàng)蓋,轉(zhuǎn)盤(pán)及罩子內(nèi)外表面。

　　（3）采樣器經(jīng)消毒后不放入培養(yǎng)皿,啟動(dòng)儀器空轉(zhuǎn)運(yùn)行不少于5 min,使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)。

　　（4）根據(jù)被測(cè)地點(diǎn)的潔凈度設(shè)定采樣量，采樣器的流量(L/min)X采樣時(shí)間(min)=采樣量(L)。

　　（5）采樣操作時(shí),培養(yǎng)皿應(yīng)輕拿輕放,用“五指抓拿”培養(yǎng)皿外徑,盡量避免人為對(duì)樣本造成污染。

　　（6）根據(jù)被測(cè)地點(diǎn)的面積確定采樣點(diǎn)的布置及采樣點(diǎn)數(shù)量。

　　3、浮游菌采樣器的使用注意事項(xiàng)

　　（1）采樣器應(yīng)該充分清潔滅菌。如果清潔滅菌不充分，浮游細(xì)菌采樣器上的細(xì)菌脫落飛揚(yáng)，就有可能增加采到的細(xì)菌數(shù)量，測(cè)定結(jié)果可能出現(xiàn)巨大的誤差。

　　常用的滅菌方法有兩種，（1）使用75%乙醇對(duì)一臺(tái)采樣器每一級(jí)撞擊板的表面和背面，以及撞擊板周邊密封圈和進(jìn)氣口等部位進(jìn)行擦拭消毒。

　　（2）使用高壓蒸汽滅菌采樣器取下密封圈，每一級(jí)獨(dú)立包裝后使用壓

　　力蒸汽滅菌器在102.9Kpa，121℃條件下高壓滅菌30min。

　　（2）正確調(diào)節(jié)噴射距離。氣體噴射器狹縫到培養(yǎng)基的距離關(guān)系到細(xì)菌撞擊培養(yǎng)基的力度。距離較近，撞擊培養(yǎng)基的力度較大；距離較遠(yuǎn)，撞擊培養(yǎng)基的力度較小。采樣前應(yīng)將噴射距離調(diào)節(jié)到標(biāo)準(zhǔn)量值。

　　（3）將流量調(diào)節(jié)到標(biāo)準(zhǔn)量值。氣體的流量關(guān)系到氣體的噴射速度。速度過(guò)大則撞擊的力度也大，速度過(guò)小則撞擊的力度也小，所以采樣前應(yīng)將流量調(diào)節(jié)到標(biāo)準(zhǔn)量值。由于采樣頭的多孔結(jié)果尺寸固定，如果采樣器流量達(dá)不到設(shè)定值，則撞擊速度將發(fā)生偏離，采集到浮游菌就有偏差。因此，采樣流量是浮游菌采樣器的重要指標(biāo)。一般采用流量計(jì)對(duì)浮游菌采樣器的泵體流量進(jìn)行校準(zhǔn)測(cè)試。

　　（4）根據(jù)細(xì)菌濃度選取采樣時(shí)間。采入培養(yǎng)皿中的細(xì)菌數(shù)決定培養(yǎng)皿中細(xì)菌的密度。密度過(guò)小，統(tǒng)計(jì)到的細(xì)菌個(gè)數(shù)較少，統(tǒng)計(jì)誤差較大；密度過(guò)大，容易相互重疊，產(chǎn)生漏計(jì)誤差。所以培養(yǎng)皿中細(xì)菌的密度應(yīng)適中。在氣體中細(xì)菌的濃度固定、氣體的流量固定的情況下，采樣的時(shí)間越長(zhǎng)，培養(yǎng)皿中細(xì)菌的密度越大；采樣的時(shí)間越短，培養(yǎng)皿中細(xì)菌的密度越小。